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淺述細胞適應msc無血清培養(yǎng)基的方法News
淺述細胞適應msc無血清培養(yǎng)基的方法
更新時間:2021-08-17 點擊次數(shù):1124次
  msc無血清培養(yǎng)基和試劑被廣泛的應用于培養(yǎng)哺乳動物和無脊椎動物細胞以制備單克隆抗體,病毒抗原和重組蛋白等。大多數(shù)的產(chǎn)品含有向細胞內(nèi)轉運離子的轉鐵蛋白和調(diào)節(jié)葡萄糖攝取量的胰島素,以及一些蛋白質(zhì)和清蛋白,纖維蛋白,胎球蛋白等,這些蛋白在細胞培養(yǎng)中發(fā)揮各種不同的功能,如提供細胞貼壁所需的基質(zhì),抗生物反應器剪切力,作為脂質(zhì)和其他生長分化因子的載體等。
  下面要為大家介紹的是細胞適應msc無血清培養(yǎng)基的方法:
  1、直接適應:細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉換到無血清培養(yǎng)基(SFM)中。
  一些類型細胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應本產(chǎn)品。對于直接適應,接種細胞密度應該:2.5×10~3.5×10細胞/ml。當細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml時,傳代培養(yǎng)細胞。當細胞密度在培養(yǎng)4到7天后達到2×10~4×10細胞/ml時,細胞*適應了。每隔3~5天,當細胞密度達到1×10~3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應了本產(chǎn)品的細胞培養(yǎng)物應該再次傳代培養(yǎng)。
  2、連續(xù)適應:分好幾步把細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉換到本產(chǎn)品中,與直接適應相比較,連續(xù)適應趨向對于細胞更加溫和一些。
  (1)以2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養(yǎng)物到75%有血清培養(yǎng)基:25%SFM混合培養(yǎng)基中,傳代培養(yǎng)。
 ?。?)當細胞密度>5×10細胞/ml時,以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,在有血清培養(yǎng)基:SFM為50∶50的混合培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
 ?。?)以2×10到3×10細胞/ml細胞密度,25%有血清培養(yǎng)基和75%SFM中傳代培養(yǎng)。
 ?。?)當細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml(接種后4到6天),在100%SFM培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。
 ?。?)每隔3到5天,當細胞密度達到1×10到3×10細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應了無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應該再次傳代培養(yǎng)。
  希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。