血清是較為常用的標本,血漿一般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽性和假陰性結果主要是干擾性物質所致,抗體檢測試劑盒分為內(nèi)源性物質和外源性物質兩種,其中內(nèi)源性物質又分為:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反應物質和其它物質等。
1、類風濕因子
人血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的FC段直接結合,從而導致假陽性。
解決該情況的辦法是:①用F(ab)2替代完整的IgG;②標本用聯(lián)有熱變性(63℃,10min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有效);③檢測抗原時,可以用2-巰基乙醇等加入到標本稀釋液中,使RF降解。
2、嗜異性抗體
人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig(s)結合的天然嗜異性抗體,可將ELISA系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來,也能造成假陽性。解決的辦法是:可在標本稀釋液中加入過量的動物Ig(s),但加入量不足或亞類不同時無效。
3、補體
ELISA系統(tǒng)中固相一抗和標記二抗過程中,抗體分子發(fā)生變構,其FC段的補體C1q分子結合位點被暴露出來,使C1q可以將二者連接起來,從而造成假陽性。
解決的辦法是:①用EDTA稀釋標本;②用53℃,10min或56℃,30min加熱血清使C1q滅活。
4、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig(s)抗體
抗體檢測試劑盒臨床開展的用鼠源性CD3等單克隆抗體治療,用放射性同位素標記鼠源性抗體的影像診斷及靶向治療等新技術,均有可能使這些病人體內(nèi)產(chǎn)生抗鼠抗體;另外,被鼠等嚙齒類動物咬傷的病人體內(nèi)也可以產(chǎn)生抗鼠Ig(s)抗體。這些病人ELISA測定時均可產(chǎn)生假陽性。
解決的辦法是:測定抗原時,在標本中加入足量的正常鼠Ig(s),從而克服由于上述原因造成的假陽性。