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cck如何進(jìn)行cck8試劑的檢測(cè)步驟
點(diǎn)擊次數(shù)：3257 更新時(shí)間：2018-04-16
對(duì)于cck8試劑如何進(jìn)行檢測(cè)，小編發(fā)現(xiàn)有許多用戶都不知道如何進(jìn)行，那今天呢小編就此問(wèn)題以文章的形式給大家講一講cck8試劑的檢測(cè)步驟吧
cck8試劑檢測(cè)步驟
1. 向各孔中加入100 μl細(xì)胞懸液。a) 2. 在37℃下預(yù)孵育培養(yǎng)板。b)
3. 向各孔中加入各濃度的待測(cè)溶液c)10 μl。 4. 37℃下孵育。
5. 向各孔中加入10 μl的cck8試劑溶液d)。 6. 37℃下孵育1-4小時(shí)。e) 7. 測(cè)定450 nm處的OD值。
a) 使用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基制備50,000-100,000個(gè)/ml的細(xì)胞懸液。 b) 建議使用CO2培養(yǎng)箱過(guò)夜預(yù)培養(yǎng)。 c) 使用培養(yǎng)基或PBS來(lái)制備溶液。
d) 如果待測(cè)溶液有還原性，測(cè)定不含細(xì)胞，但含有cck8試劑的待測(cè)溶液在450 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入cck8試劑 ，如果吸光度相對(duì)較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的100 μl培養(yǎng)基和10 μl cck8試劑進(jìn)行檢測(cè)。 e) 白細(xì)胞可能需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
活力計(jì)算
細(xì)胞活力*（％）=[A(加藥)-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）] ×100 A（加藥）：具有細(xì)胞、cck8試劑溶液和藥物溶液的孔的吸光度 A（空白）：具有培養(yǎng)基和cck8試劑溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度 A（0加藥）：具有細(xì)胞、cck8試劑溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度 *細(xì)胞活力：細(xì)胞增殖活力或細(xì)胞毒性活力
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